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Tecnología de ADN recombinante


Cada fragmento de ADN, que se ha escindido y separado del resto del material genético, contiene uno o más genes.

Recuerde que cada gen da lugar a una proteínaEntonces, mientras estudiamos el gen, estamos estudiando la proteína que codifica.

Pero, ¿qué debemos hacer para estudiar el gen?

Debemos introducirlo en el material genético (ADN) de un huésped para que ocurra la transcripción del gen de ARNm y la traducción de proteínas.

El anfitrión Es un organismo que se multiplica (se reproduce) rápidamente, como las bacterias. Cuando las bacterias se reproducen por bipartición, transmiten su material genético a sus "hijos", por lo que si este material contiene el fragmento de ADN del estudio, pronto tendremos millones de bacterias con el gen.

El plásmido Es el material genético circular no unido al cromosoma que se transmite por el hialoplasma de las bacterias. Se somete al mismo proceso que la transcripción y traducción del ADN cromosómico, y se multiplica con cada división celular, pasando una copia a cada célula "hija".

El plásmido se elimina de las células bacterianas para que el gen del estudio pueda insertarse y luego reemplazarse en la bacteria.

Para una mejor comprensión, conozcamos este proceso paso a paso (siga en la imagen):

  1. Los investigadores quieren estudiar un gen humano que produce una proteína que no se sabe que funciona.
  2. Los investigadores "cortan" (usando enzimas de restricción) del ADN humano, el gen de interés.
  3. Este fragmento de ADN que contiene el gen se multiplica por PCR para obtener múltiples copias del mismo fragmento (o la misma información).
  4. La misma enzima que escindió el gen del ADN humano se usa para escindir el plásmido bacteriano. Recuerde que el fragmento de ADN, cuando se corta, genera puntas adhesivas que son complementarias al plásmido si se corta con la misma enzima.
  5. Luego, el plásmido escindido se mezcla con los fragmentos de ADN (que contienen el gen) y una enzima llamada ligasa "pega" los fragmentos al plásmido, produciendo el llamado plásmido. ADN recombinante. Hecho esto, el ADN recombinante se introduce en una bacteria huésped.
  6. Un bacterias huésped Se coloca en un medio nutritivo selectivo, solo aquellos con ADN recombinante crecen en colonias. Después de muchas generaciones de bacterias, el producto de expresión génica, las proteínas humanas, se purifica de las bacterias (se separan de las proteínas bacterianas).

Este método produce una gran cantidad de proteínas humanas, lo que permite su estudio.